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免疫试剂盒

进口：vitlab移液器、Thermo移液器、socorex移液器、Rainin移液器、Nichiryo移液器、Labnet移液器、枪头、瓶口分液器、连续式吸头、连续等分移液器

产品特点 1. 便捷快速：与Lowry法相比，elisa试剂盒方法可在1 小时内完成蛋白质定量检测，工作液配制后24h内使用无影响。 2. 灵敏准确：测定范围是20～2000 ug/ml（562 nm读数）。在测定范围内有良好的线性关系，变异系数小。 3.兼容性好：与Bradford法相比，对去垢剂耐受能力大为提高，在Tween20低于4%，NP40低于5.0%，SDS低于4%，Triton X-100 低于4%的浓度范围内， 4. 即可获得准确定量结果（其余物质耐受度详见说明书）。使用微板法测定时将体积按比例减小。
订货说明：
1.当天下午3点30分之前下单，可当天发货。
2.进口期货货期一般3-4周，部分产品现货请咨询业务人员。
3.客户对定制产品有特殊要求，要提前备注。
4.送货方式：快递上门，如特殊产品业务员亲自派送。
5.客户收到产品，如发现产品有破损及时与我司联系，我司会在第一时间处理。
6.笃玛品质保证，价格优势。生物种类试剂齐全，欢迎广大客户咨询订购。
1.试剂盒的保存：未开封试剂盒请置于2-8℃环境中储存，并在有效期内使用；已开封试剂盒，请尽快使用，避免稀释液长菌或组份降解失效；切勿酶标板置于-20℃环境中储存，底物溶液保存或使用时请务必避光。
2.工作试剂配制：请临用前30分钟内配妥。初次使用，各组份试剂请务必摇匀或离心，以便试剂集中到管底；因实际装量多余标示装量多余标示装量，配制工作试剂请用精准的计量工具（移液枪或量筒等）量取，切勿不经量取直接使用。
3.酶标板：铝箔袋出现漏气并不影响板的储存及使用；酶标板条可拆卸，每次根据实验需要量取孔进行操作，切勿不经拆卸用整块板来进行预实验。
4.上样：一次加样时间推荐控制在5分钟以内，并保证每孔上样量一致，以确保反应一致性。
5.孵育：实验中为防止样本蒸发或污染，请于酶标板上加盖或覆膜，稳拿轻放，防止外溅；随时观察温箱温度是否恒定于37℃，及时调整，孵育反应期间，温箱不宜开启太多次，以免影响温度平衡。
6.洗涤：确保蒸馏水水质合格；为保证每孔上样量一致，请使用多通道移液枪操作，若采用洗板机，请确保洁净度，以免污染；切勿冲洗，洗涤力道适中，垂直甩板，充分洗涤，降低边缘效应。
7.组份：不同批次实际，不可混用；不同组份瓶盖间避免交叉使用，以免污染；切勿随意替换试剂盒中组份。
8.读值：加入终止液后，请在5分钟之内读数，最迟不超过15分钟，以免产生褐色沉淀物，影响吸光度；请确保酶标仪的设置无误，滤光片经校准合格。
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老师您好：
    我是上海笃玛生物科技有限公司的杨燕燕，看到您在丁香通上的留言需要，如果您需要资料或者需要订购，请联系：021-60520536 15921657703
我司代理的品牌：试剂：Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物试剂及耗材：R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等

笃玛生物外包实验免疫组化、TUNEL（凋亡）实验、原位杂交实验、HE染色、特殊染色、免疫印迹（WB），免费代测ELISA实验。
1.提供原始实验记录本及原始电子数据，包括原始图片、胶片、机图等并与最终出具的实验报告相匹配，确保实验数据与结果真实可靠。
2.严格的质控标准。
3.定期汇报项目进展情况，对问题及时进行沟通反馈。
4.所有实验所用试剂及原始数据3-6月保存，有据可查。
合作客户:上海医药，仁济医院，新华医院，上海药物所，二军大，北京中医药大学
有专业的技术服务和完善的售后体系，不必烦恼实验中遇到的问题，不必担心产品的售后，笃玛生物统统为您解决。
您好，定制抗体的价格为每个抗体6400元，抗体制备周期为2.5-3个月。
流程为：分析蛋白序列选择抗原片段——合成抗原片段，偶联载体蛋白——免疫动物（多次免疫、采样、检测）——取血清，检测——纯化——交货
我们提供的产品包含：
20ml兔抗原血清，可纯化得到特异性抗体，也可直接用于检测试验
10mg纯化好的兔IgG特异性抗体，由血清纯化得到
1-3mg多肽抗原，用于检测抗体的效价
鸡蛋蛋清中C型溶菌酶检测
实验目的：
   检测蛋清中C型溶菌酶的含量。 
实验样本：
鸡蛋蛋清，客户提供。
样本数量：
86个。
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样本处理步骤：
     1.样本清点：对客户送样进行统计编号，对所有样本进行统计登记。
     2.样本稀释。按照客户指南，蛋清仅经过取样，搅拌，未进行稀释。根据之前的经验，蛋清属于高蛋白样本，需要提前稀释样本。随机取3个样本，用0.8%生理盐水进行100,200,500，1000倍稀释（考虑到上样时还需进行5倍稀释，故此梯度不用拉太大），进行简单的蛋白定量跟上样检测。结合预实验的结果跟参考文献，选定200倍稀释。
检测步骤：
     1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
     2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
     3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
     4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
     5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。
     6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
     7.加入50μL终止液使反应停止，450nm处检测光吸收值。
 所用仪器：
     帝肯Infinite F50酶标仪

操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注：
1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

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操作常见问题解析：
1.加样?
在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。
2.边缘效应
使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应"，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定的重复性。

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